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脉冲式均质器在食品微生物快速检测中的应用研究

1 材料
1.1 试验材料
美国3M公司细菌总数测试片,美国3M公司酵母菌/霉菌测试
 
片,检测样品来源于市场随机购买。 1.2 主要培养基
 
平板计数琼脂培养基、孟加拉红培养基、伊红美蓝琼脂、 Baird-Parker 琼脂基础、亚硫酸铋(BS)琼脂。以上培养基均由广东
环凯微生物科技云南11选5开奖结果提供。 1.3 主要仪器设备
 
ShockMixer-1 脉冲式样品前处理器(环凯制造)、拍打式均质器、搅拌式均质器、振荡器、高压蒸气灭菌锅、超净工作台、电子天平、移液枪、生化培养箱。
1.4 菌株
大 肠埃希菌 [CMCC(B)44102] 、金黄色葡萄球菌[CMCC26003]、福氏志贺氏菌[CMCC(B)51572]、乙型副伤寒沙门氏菌[CMCC51572]。以上菌种均由广东环凯微生物科技云南11选5开奖结果
提供。
 
1.5 脉冲式均质器的工作原理通过高频率震动内装食品样品的专用胶袋,产生强烈冲击波
 
与高速搅动联合作用,将食品中的微生物驱赶到样品悬液中,形成菌浓度均匀的样品稀释液。减轻了对样品的破坏,从而极大地减少了样品碎片的产生。食品样液澄清度高,能与快速检测方法更配套。
 
2 试验方法
 
2.1 平板法 
2.2 快速测试法 2.2.1 细菌总数快速测试片法
 
(1)利用脉冲均质器把样品制成1∶10的样品匀液,按样品的特性再进一步稀释为1∶100,1∶1000等浓度的供试液。
(2)在平坦的实验台表面解开测试片的上层膜,用移液枪吸取
1 mL样品供试液,垂直滴加在测试片的中央。把上层膜盖下或直接落下,但不可滚动上层膜。使用压板隆起面底朝下,放置在上层膜中央,轻轻地压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上,切勿扭转压板。拿起压板,静置**少1 min以使培养基凝固。每个样品做2个平行试验。
(3)测试片的透明面朝上,可堆叠**20片,水平置于培养箱内
36±1 ℃培养48±2 h。
2.2.2 酵母菌霉菌快速测试片法
(1)样品前处理同2.2.1(1)。
(2)测试片使用方法同2.2.1(2)。
(3)将测试片的透明面朝上,水平置于培养箱内21~25 ℃培养
3~5 d。
 
3 结果与讨论
 
3.1 脉冲式均质器对微生物的杀灭影响用现行国标平板计数法分别检测大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌的菌悬液。把各一定浓度的菌悬液分别以 15 s、30 s、60 s、180 s 的脉冲时间处理,检测
脉冲波处理是否会对微生物生存造成不利影响,结果见表 1。
 
由实验结果可见脉冲处理不影响大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌的生存,不对其构成杀灭作用。
 
1  脉冲前处理对标准菌株生存的影响
    Tab.1  The influence on standard strains survival by pulse
      Pretreatment   cfu·mL-1
    实验菌株   脉冲时间  
           
    15 s 30 s 60 s 180 s
     
    大肠埃希菌 150 143 140 156
    金黄色葡萄球菌 76 72 76 80
    福氏志贺氏 89 80 90 90
    乙型副伤寒沙门氏菌 127 130 120 130
 
3.2 比较试验
对市场上随机购买的5个样品分别采用脉冲式均质器、拍打式均质器与旋转搅拌式均质器进行前处理后利用微生物快速测试片,对检品的菌落总数和霉菌进行快检。同时用脉冲法前处理后的样液做国标的平板法,结果见表2。从表中可看出脉冲式前处理
4 结论      
       
在市面上流通的食品,大部分都属于快速消费品,因此提高
 
此类快消品的微生物检测速度和准确度,对有效的保证食用人群
 
的身体健康具有重要的意义。在微生物快速检测中,采用快速测
 
试片是常用的方法。此方法具有显著的优点:**,减少培养基
配制工作,可及时检测,缩短准备时间。第二,在取样时同时接
 
种,结果更能反映当时样本中真实的细菌数。第三,不需要大量
 
的玻璃器皿,操作简便;易于保存,便于运输,工作量小。第四,
避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。在食品的微生物快
速检测中,样品前处理的好坏会影响快速检测的准确度。现时国
际上比较新式的方法是使用脉冲式均质器。这种方法优于目前国
内普遍使用的拍打式和旋转搅拌式均质器。脉冲式前处理对食品
中微生物无杀灭作用,通过与国标方法对比,证实检测效果良好,
可以应用于微生物快速检验工作中。脉冲式均质器的优点有:第
一,减少食品碎片的产生,**大限度地减少对一些快速检验方法
的干扰因素。第二,无需打碎样品,不会导致样品处理袋的破裂。
第三,样品碎片较少,样品液澄清,易于取样,易于过滤,节省
时间。第四,高效的样品处理方法微生物的释放效果等同甚**优
 
于其他方法。世界上已有一些国家或组织批准了这种方法,如国
际标准化组织在《ISO7218:2007食品与饲料中微生物微生物学
 
检验总的要求与指导》第三版5.4中,把脉冲均质法列为三种指定
 
仪器样品均质前处理方法之一[2]。因此,在微生物快速检测中,
使用脉冲式均质器均质可提高工作效率和减少检测的干扰性,应
 
大力推广应用于食品微生物快速检测前处理中。

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