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均质器在一次性使用卫生用品检验中的应用

以纸质为原料的一次性使用卫生用品,例如纸
 
巾、妇女经期卫生用品、尿布等卫生标准均有细菌数检测指标,在质量抽检中为必检项目。含菌量检验方法是依照 GB15979 - 2002《一次性使用卫生用品
〔1〕 ,
卫生标准》 规定执行 其检验样液的制备是采用生理盐水稀释法。操作中将检样剪碎后加入到无菌生理盐水中,充分混匀和稀释接种培养,对其含菌量进行活菌计数。但这种处理方法经常会造成检测结果不一致,菌数波动较大。本研究引进食品微生物检测中的均质器法,用均质器进行一次性使用卫生用品的样液制备,同时与稀释法作平行比较。
 
1 材料与方法
 
1. 1   材料
 
试验样品为 5 种纸巾,每种纸巾分别准确称取
 
10 g ,每种 6 份,装入牛皮纸袋内经 160℃ 干热灭菌
 
2 h 后备用。
 
主要仪器有拍击式均质器,GRX - 9073A 型热空气消毒箱,全自动压力蒸汽灭菌器和高压消毒器和洁净工作台。
 
试验菌株为大肠杆菌( ATCC 25922) ,培养基用营养琼脂培养基和乳糖胆盐发酵培养基,稀释液为
灭菌生理盐水。
 
1. 2   方法
 
1. 2. 1 菌悬液制备 将大肠杆菌传代培养,取第 3
 
代营养琼脂培养基斜面新鲜培养物,用 5 ml 灭菌生理盐水将菌苔洗下,充分混混后制备成试验浓度的菌悬液。
 ** 102 ~ 105 cfu / ml 不同含菌量的菌悬液,以常规活菌计数法测定含菌量。将各纸巾检样分为 A、B 组,每种每组 3 份,在每份检样中滴染不同浓度菌悬液
 
1 ml,在无菌室内自然晾干,备用。
 
1. 2. 3 检测方法 ① 生理盐水稀释法: 将 B 组染菌检样剪碎后加入到 200 ml 灭菌生理盐水中,充分混匀,制备成生理盐水样液。取样液 1 ml 接种无菌平皿,倒入冷却** 45℃ 的熔化的营养琼脂培养基 15 ~
 
20 ml 混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置 37℃ 培
 
养 48 h,观察结果,计数平板菌落数并计算出细菌总数。② 均质器处理法: 将 A 组染菌检样剪碎后加入
 
到 200 ml 灭菌生理盐水中,用拍击式均质器拍打
 
1 ~ 2 min,制备成生理盐水样液。按上述方法接种培养。③ 结果计算: 要求每个平板上菌落数在 30 ~ 300 cfu / 平板之间,按以下公式计算结果: 细菌总数
 
= 平板菌落数 × 稀释度。
 
2 结果
 
统 计 分 析 结 果 表 明,在 检 样 含 菌 量 高 于
 
103 cfu / g情况下,采用均质器处理法检测出细菌数比生理盐水稀释法检测更接近实际菌数,两种方法
 
的检测结果有显著统计学意义( P < 0. 01) 。随着检样中含菌量的增加,生理盐水稀释法的检测结果较实际含菌量明显偏低( 表 1) 。
 
3 讨论
 
经对 5 种一次性使用卫生用品的检测结果表明,按照 GB15979 - 2002《一次性使用卫生用品卫生标准》规定的细菌检验方法与均质器处理法相比, 
 
  表 1 两种方法检测菌数比较
   
染菌量组 两种方法检出菌数( cfu / g)
( cfu /10g)    
均质器处理法 生理盐水稀释法
       
102 ~ 103 31 29
103 ~ 104 3 1
104 ~ 105 21 7
 
在样品含菌量低时两种方法的检测结果没有显著性差异,随着样品含菌量的增加生理盐水稀释法的检测结果明显比均质器处理法的结果偏低,两种方法的结果有显著统计学意义( P < 0. 01) 。样品的均质器处理法已普遍用于食品、药品等微生物检测
 
的样品处理。由于以纸浆、纸、纤维素絮纸等为原料加工制成的一次性使用卫生用品,质量轻、体积大、吸水性好对细菌菌落总数的检验影响比较大。而从各地一次性使用卫生用品的卫生状况调查报告
〔2 - 4〕,
中 可以看到一次性使用卫生用品的卫生质量状况堪忧,不合格原因主要集中在细菌菌落总数和
 
〔5〕
真菌菌落总数超标 。2011 年进口一次性使用卫生用产品安全卫生项目中产品微生物项目不合格批

数 11 批,重量 141. 5 t,货值 21. 6 万美元6,占安全卫生项目中不合格批数的 68. 8% 。因此均质器处理法在一次性使用卫生用品的检测中应用显得尤为
 
重要。均质器处理法在一次性使用卫生用品的检测中可以作为一种样品处理方法写入国家标准检验方
 
法进行推广应用。
 
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